基础医学研究

  • siRNA对HeLa细胞膀胱癌相关蛋白基因表达的抑制作用

    左泽华;张力;伍欣星;赵旻;

    目的:构建抑癌基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)基因高效真核siRNA载体,转染人宫颈癌细胞系HeLa,构建BLCAP基因沉默细胞系,以观察靶向siRNA对BLCAP基因的表达抑制作用。方法:设计并重组靶向siRNA各3条,分别命名为pRNA-U6.1-B1,B2,B3-siRNA,重组体经脂质体转染细胞,通过荧光显微镜观察细胞内质粒表达情况,并采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后BLCAP基因mRNA及蛋白的表达,验证RNAi作用的特异性及时效性。结果:同对照组相比,各BLCAP siRNA均可引起靶基因表达水平的显著性下降(P<0.05),尤以pRNA-U6.1-B2-siRNA的作用效果最强(P<0.01);而空脂质体组及阴性对照siRNA组的靶基因表达水平则无明显变化。将pRNA-U6.1-B2-siRNA转染细胞后12,24,48h均可观察到靶基因表达的显著性降低(P<0.05),其中在24h后达到最强抑制效果。结论:不同序列的siRNA,对靶基因的干扰效率不同;BLCAP基因siR-NA能够特异、高效性的抑制靶基因的表达;抑制作用在24h达到高峰,并可维持到转染后48h。试验结果为进一步研究采用RNA干扰技术进行宫颈癌的生物治疗奠定了基础。

    2011年06期 v.32 709-712+732页 [查看摘要][在线阅读][下载 163K]
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  • 真核表达质粒pVAX1-Der p1的构建及在真核细胞中的表达

    曹炜;许昱;曹瑞娟;

    目的:构建真核表达质粒pVAX1-Der p 1,检测质粒编码的重组蛋白在真核细胞293T中的表达,为进一步的动物实验打下基础。方法:分离屋尘螨总RNA,根据GenBank已公布的Der p 1核酸序列设计引物,PCR扩增Der p 1编码基因,以其全长为目的基因,定向克隆至真核表达载体pVAX1,将其转化大肠杆菌DH5α,筛选含有重组质粒pVAX1-Der p 1的阳性克隆,培养后提取质粒并对其进行双酶切鉴定和序列测定及分析;应用Lipo-fectamine 2000脂质体转染剂,重组基因pVAX1-Der p 1和空质粒pVAX1分别转染真核细胞293T,采用细胞免疫荧光方法,以抗Der p 1特异性抗体检测质粒编码的重组蛋白在293T细胞中的表达情况。结果:获取的Der p 1基因与Genbank上Der p 1cDNA全长序列完全一致,且构建的表达载体实现了目的蛋白的表达。结论:我国本土屋尘螨Der p 1序列与GenBank已公布的核酸序列完全一致;成功构建含Der p 1全长序列的真核表达质粒pVAX1-Der p 1,其能在真核细胞成功表达重组蛋白。

    2011年06期 v.32 713-716+722页 [查看摘要][在线阅读][下载 252K]
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  • 细胞外信号调节激酶对细胞周期调控的影响

    张贵斌;王伟;徐运兰;王萍;田代实;

    目的:研究脑缺血后细胞外信号调节激酶(ERK)对细胞周期调控的影响。方法:建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为脑缺血组(对照组及干预组)和假手术组。干预组于缺血前30min尾静脉注入ERK阻滞剂U0126,对照组尾静脉注入相同体积不含U0126的DMSO稀释溶液。应用免疫组织荧光化学法观察细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白E(Cyclin E)阳性细胞表达;免疫印迹(Western blot)检测磷酸化ERK1/2(pERK1/2)、Cyclin D1和Cyclin E的蛋白表达;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察转录因子E2FmRNA的表达。结果:干预组Cyclin D1和Cyclin E阳性表达的细胞数较对照组显著减少(P<0.05);缺血对照组pERK1/2蛋白表达明显强于干预组(P<0.05),4h时间点表达最为明显,12h时间点恢复到基线水平,Cyc-lin D1和Cyclin E表达6h开始升高,12h表达最为明显,干预组较对照组显著减弱(P<0.05);缺血对照组E2FmRNA的表达显著强于干预组和假手术组(P<0.05),以7d表达最为明显。结论:ERK在大鼠脑缺血中发挥重要作用,抑制脑缺血引起的pERK1/2磷酸化可降低细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E和E2F的表达,即细胞外信号调节激酶可影响细胞周期的调控。

    2011年06期 v.32 717-722页 [查看摘要][在线阅读][下载 200K]
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  • 熊果酸对糖尿病大鼠肾组织内核因子-κB活性及P选择素表达的影响

    陈玲;卢金萍;李夏;杨仁勇;

    目的:探讨熊果酸(UA)对糖尿病(DM)大鼠肾组织的保护作用及机制。方法:链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组(N组)、糖尿病组(D组)、糖尿病+UA治疗组(DM+UA组);EMSA法检测NF-κB活性,RT-PCR和Western blot分别检测P选择素mRNA和蛋白表达。结果:造模成功16周后,和D组相比,D+UA组尿蛋白排泄、肾功能和肾组织病理都得到一定程度改善,且UA治疗明显抑制了DM大鼠肾组织内NF-κB激活和P选择素表达。结论:熊果酸对DM大鼠肾组织具有一定的保护作用,其机制可能通过抑制NF-κB激活和P选择素表达相关。

    2011年06期 v.32 723-726页 [查看摘要][在线阅读][下载 154K]
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  • 流式细胞技术分析多壁碳纳米管对人多药耐药性胶质瘤细胞活力的影响

    徐永红;邢怡桥;陈效;

    目的:建立荧光探针染色-流式细胞检测术(FCM)的方法用于分析多壁碳纳米管(MWCNTs)对人多药耐药性(MDR)胶质瘤细胞活力的影响。方法:将人MDR胶质瘤细胞给予不同浓度的MWCNTs处理24h。随后以一系列反映细胞功能不同方面的荧光探针(JC-1、R123、FDA和PI)在原位(in situ)和非原位(ex situ)两种条件下对细胞进行染色,以FCM对各个探针的细胞染色情况进行检测。结果:在经过MWCNTs处理的细胞中,R123染色在in situ条件下呈浓度依赖性增强,但在ex situ条件下无明显改变。JC-1染色在in situ条件下呈显著浓度依赖性降低,但在ex situ条件下仅略微减弱。FDA染色在in situ条件下随MWCNTs浓度增加呈"钟形"改变,而在ex situ条件呈小幅度增强。PI染色阳性的细胞数在两种条件下均略微增加。结论:荧光探针染色结合FCM在经过验证优化以后可有效地用于研究MWCNTs的细胞效应。在本实验的MWCNTs处理浓度和时间条件下,人MDR胶质瘤细胞的总体活力未受明显影响。但涉及细胞膜的一些功能可能发生改变。

    2011年06期 v.32 727-732页 [查看摘要][在线阅读][下载 417K]
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  • 尼美舒利与阿霉素联合应用对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡及衰老的影响

    赵泉;周绪红;王蕾;方文敏;袁玉林;

    目的:研究尼美舒利与阿霉素联合应用对骨肉瘤MG-63细胞的作用及机理。方法:MTT法检测细胞的增殖,衰老相关性β-半乳糖苷酶(SAβ-Gal)染色检测细胞衰老,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,透射电镜显示MG-63细胞的形态变化。结果:当阿霉素浓度固定在0.75mg/L时,与低浓度尼美舒利(25-200μmol/L)结合治疗细胞阻滞MG-63细胞于G2/M期及凋亡,细胞生长抑制呈浓度依赖性增高,与高浓度尼美舒利(400μmol/L)结合治疗细胞阻滞于G1/S期和衰老样生长,蛋白分析表明:bax和P21蛋白表达随尼美舒利浓度增加表达上调,而bcl-2、Cyclin E、C-myc和CDK2蛋白表达下调。结论:联合用药发挥相加作用,为临床联合用药提供了理论依据。

    2011年06期 v.32 733-738页 [查看摘要][在线阅读][下载 328K]
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  • 脂氧素A4对兔心脏骤停后综合征中心肌结构和功能的影响

    陈志桥;赵剡;周奕融;石慧娟;刘耕;

    目的:探讨脂氧素A4对新西兰兔心脏骤停心肺复苏(CPR)后血流动力学、心肌坏死面积、心肌细胞结构(光镜和电镜)、血清心肌酶水平的影响。方法:健康新西兰大白兔16只,雌雄不限,随机分为空白组(假手术组)(n=4)、对照组(CPR+乙醇组)(n=6)和实验组(CPR+脂氧素组)(n=6)。所有实验动物耳缘静脉麻醉,气管切开行气管插管,左侧颈总动脉、右颈内静脉及股动脉置管。对照组和实验组动物,夹闭气管插管5-9min后引起动物窒息,诱导心脏骤停3min后,开始胸外按压,机械通气(纯氧),静脉注射200μg/kg的肾上腺素,同时实验组静脉给予脂氧素A4(1.5μg/kg)乙醇溶液,对照组给予等体积的2%乙醇溶液。监测自主循环恢复(ROSC)4h的血流动力学指标,于ROSC后6h股动脉取血检测肌酸激酶同工酶(CK-MB),然后处死取心脏标本,测量心肌坏死面积,检测光镜HE染色、电镜下心肌结构变化,观察脂氧素对上述指标的影响。结果:对照组和实验组复苏后反映心室收缩功能和舒张功能的dp/dtmax、-dp/dtmax以及平均动脉压均显著低于复苏前(P<0.01),但实验组复苏后的收缩、舒张功能和平均动脉压的改善要明显优于对照组(P<0.01);实验组较对照组血清CK-MB值显著降低(P<0.01),左心室坏死范围减小(P<0.05),心光镜和电镜下显示心肌结构损伤减轻,未见炎性细胞浸润。结论:脂氧素A4可抑制心肌内炎症反应,减轻心脏骤停兔心肺复苏后的心肌结构损害,同时改善心室收缩、舒张功能和血压,从而改善心功能不全。

    2011年06期 v.32 739-743页 [查看摘要][在线阅读][下载 246K]
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  • 血管紧张素Ⅱ受体1型和2型在胎组织中的分布及表达特征

    孟巍;李小军;何文博;郭喻;汪晖;

    目的:研究血管紧张素Ⅱ受体1(AT1)和受体2(AT2)在胎组织中的分布及表达特征。方法:采用免疫组化和实时荧光定量PCR方法,检测胎儿组织中AT1和AT2受体的分布及其表达量。结果:免疫组化结果表明,AT1受体主要分布在心肌纤维、肾上腺皮质胎儿带、肾近曲小管、气管纤毛柱状上皮和气管腺、皮肤表皮棘细胞层、汗腺导管和毛囊上皮、脐带动脉壁平滑肌纤维、肺小动脉平滑肌、胎盘滋养层细胞质、肝细胞等处;AT2受体主要分布在心肌纤维、肾上腺皮质胎儿带、肾近曲小管、气管纤毛柱状上皮和气管腺、皮肤表皮棘细胞层、脐带动脉壁平滑肌纤维、肝细胞等处。应用实时荧光定量PCR技术,发现AT1受体基因递减表达于胃、脐带、肺、气管、肝、胎盘、肾脏、心脏、肾上腺,而AT2受体基因递减表达于脐带、胃、肺、胎盘、心脏、肾脏、气管、肝、肾上腺。结论:AT1和AT2受体在胎儿体内分布具有组织选择性,分布在脐带、心脏、胎盘、肺、肾脏和胃组织,AT2受体基因表达量明显高于AT1受体,提示AT2受体可能参与胎组织器官的发育和成熟。

    2011年06期 v.32 744-747+756页 [查看摘要][在线阅读][下载 154K]
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  • 可降解生物材料过滤装置大鼠输精管内节育的实验研究

    葛名欢;程帆;翁小东;

    目的:探讨由几丁质天然生物材料制作成的可定期降解的过滤装置应用于大鼠输精管节育的效果及其对生殖系统的影响。方法:随机将60只4月龄Wistar雄性大鼠分为实验组、输精管结扎组和对照组。并在术后2,6,12,18,31周分别进行各组大鼠的精液、体重、睾丸体积、附睾重量、近睾段输精管外径的检测,并用HE染色观察实验动物的睾丸、附睾和输精管的组织变化。结果:将材料置入输精管后可见:术后精液中精子消失的时间稍延迟于结扎组(分别为14周与12周);实验组大鼠输精管复通时间为31周;实验组、输精管结扎组和对照组睾丸体积在各时间点上相比较未见明显差异(P>0.05);实验组与输精管结扎组附睾质量和近段输精管外径在各时间点上比较有显著差异(P<0.05),而与对照组差异不明显(P>0.05);病理学观察可见结扎组大鼠睾丸、附睾、近睾段输精管变化明显,实验组变化相对较轻。结论:天然生物材料几丁质制成的可降解生物材料过滤装置应用于大鼠输精管节育,具有较好的效果和安全性。

    2011年06期 v.32 748-751页 [查看摘要][在线阅读][下载 109K]
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  • 核因子-κB在糖尿病大鼠肾组织中的表达及意义

    王蜀鄂;李竞;王丹;秦莹;

    目的:观察链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织核因子-κB(NF-κB)的变化,以及抑制NF-κB活性对糖尿病大鼠肾组织的影响。方法:60只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为3组:C组即正常对照组、M组为糖尿病未干预组、P组为吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC,NF-κB活性抑制剂)干预组。每组20只,以链尿佐菌素造糖尿病模型。分2批于4周、8周处死,测肾重指数、24h尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐、尿素氮、血脂、糖化血红蛋白等指标,用免疫组化方法测肾组织NF-κB的表达。结果:M组与C组与比较,大鼠肾组织中NF-κB的表达明显增强(P<0.01),P组大鼠肾组织中NF-κB的表达较M明显下降(P<0.01),但仍高于C组(P<0.01)。相关分析表明,肾组织中NF-κB表达量与UAER成正相关。结论:糖尿病大鼠肾组织NF-κB表达及UAER显著升高,抑制NF-κB的表达可降低UAER,对NF-κB深入研究将有助于防治糖尿病的发生和发展。

    2011年06期 v.32 752-756页 [查看摘要][在线阅读][下载 141K]
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  • 盐酸戊乙奎醚对曲马多依赖大鼠相关脑区cAMP、p-CREB及D2受体的影响

    彭俊敏;昌睿杰;陈凯;詹佳;陈畅;张宗泽;王焱林;

    目的:观察盐酸戊乙奎醚(PHC)对曲马多依赖大鼠相关脑区cAMP、p-CREB及D2受体的影响。方法:雄性SD大鼠30只,随机分为3组(n=10):对照组(C组)、曲马多依赖组(T组)和盐酸戊乙奎醚治疗组(P组)。连续7d皮下注射曲马多,诱导大鼠曲马多依赖条件性位置偏爱效应(CPP)。第8天P组腹腔注射PHC;C组及T组腹腔注射等体积的生理盐水。30min后各组大鼠行CPP测试。实验结束后处死大鼠,分离相关脑区(中脑腹侧被盖区、前额叶皮层、伏隔核)。检测cAMP含量、p-CREB的蛋白表达和D2受体的mRNA水平。结果:与T组比较,P组灰区停留时间缩短;相关脑区中cAMP、p-CREB含量显著降低(P<0.01)、D2的mRNA含量明显升高(P<0.01)。与C组比较,T组灰区停留时间延长,相关脑区中cAMP、p-CREB含量显著增高(P<0.05或P<0.01)、D2受体的mRNA含量显著降低(P<0.01)。结论:盐酸戊乙奎醚能抑制曲马多依赖大鼠条件性位置偏爱的表达,该效应可能通过降低相关脑区cAMP含量,抑制p-CREB蛋白表达,上调D2受体mRNA等起作用。

    2011年06期 v.32 757-760页 [查看摘要][在线阅读][下载 119K]
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  • 追赶肥胖大鼠血清瘦素及游离瘦素受体水平的变化

    于萍;文重远;李凝旭;

    目的:通过观察大鼠追赶肥胖过程中瘦素及游离瘦素受体水平变化,进一步揭示追赶肥胖发生机制。方法:5周龄Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后随机分为对照组(NC)和追赶肥胖组(RN),RN组予半量饮食喂养4周后开放饮食8周,NC组开放饮食12周。分别于实验第0,4,6,8,12周采集血液并剥离内脏脂肪,测内脏脂肪(以两侧肾周及附睾脂肪为代表)重量/体重比值;用ELISA法测血清游离瘦素受体(sLR)及瘦素水平。结果:实验第4周,与NC组比较,RN组血清瘦素水平、内脏脂肪/体重比值明显降低(P<0.05),sLR变化无统计学意义,开放喂养后RN组血清瘦素水平、内脏脂肪/体重比值呈时间依赖性升高,于第8周时显著高于NC组(P<0.05);而sLR在第6周时则明显低于NC组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:在追赶生长过程中sLR浓度下降、瘦素水平增高引发瘦素抵抗,瘦素功能不足可能是造成追赶肥胖的原因。

    2011年06期 v.32 761-763+768页 [查看摘要][在线阅读][下载 157K]
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临床医学研究

  • 家族性阿耳茨海默病SORL1基因SNP位点的筛选

    刘军;魏芸;代明;谭云;缪勇;邱小萍;

    目的:研究在家族性阿耳茨海默病(FAD)和无家族史健康人群中枢载脂蛋白E受体(SORL1)基因单核苷酸多态性(SNP)位点的筛选。方法:收集武汉地区具有家族史的阿耳茨海默病(AD)血样品41例,无家族史的健康人群50例,利用SNaPshot分型系统,针对SORL1基因5′端中8,9,10(rs668387,rs689021,rs641120)3个SNP位点及3′端19,23(rs2070045,rs3824968)两个SNP位点进行检测。结果:发现在FAD SORL1基因3′端的SNP23A等位基因(TA,AA)与无家族史健康人群相比有显著性差异(P=0.001,P<0.001)。结论:SORL1基因的SNP 23位点有可能是FAD标志性基因,进一步的研究有待于扩大样本量。

    2011年06期 v.32 764-768页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K]
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  • SP-D基因多态性和蛋白水平与成年女性尿路感染易感性的相关性研究

    刘娇;梁伟;丁国华;王桂荣;

    目的:研究表面活性蛋白-D(SP-D)基因多态性和蛋白水平与汉族成年女性尿路感染(UTI)易感性的相关性。方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)的方法对32例女性尿路感染易感患者组和30例女性健康对照者组进行SP-D-Thr11Met、SP-D-Thr160Ala外显子位点的基因多态性检测;同时应用ELISA方法分析尿路感染易感患者和健康对照者血液中SP-D蛋白的水平。结果:SP-D-Thr11Met位点尿路感染女性易感患者Thr/Thr,Thr/Met,Met/Met基因型频率分别为28.1%,56.3%,15.6%,而健康对照组分别为36.7%,50.0%,13.3%;尿路感染易感组11Thr和11Met等位基因的频率分别为43.8%,56.2%,健康对照组的频率分别为38.3%,61.7%,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。SP-D-Thr160Ala位点尿路感染女性易感患者Thr/Thr,Thr/Ala,Ala/Ala基因型频率分别为18.8%,34.4%和46.9%,而健康对照组分别为10.0%,33.3%和56.7%;尿路感染易感组160Thr和160Ala等位基因的频率分别为35.5%,64.4%,健康对照组的频率分别为26.7%,73.3%,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。尿路感染易感患者血中SP-D蛋白浓度明显高于健康对照组血中SP-D蛋白浓度(P<0.05)。结论:SP-D-Thr11Met和SP-D-Thr160Ala位点等位基因的变异可能不能导致汉族成年女性对尿路感染易感;而血中SP-D蛋白的水平可能与成年女性尿路感染易感性相关。

    2011年06期 v.32 769-772+782页 [查看摘要][在线阅读][下载 147K]
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  • Th17细胞和Treg细胞与不明原因复发性流产的关系

    蒋艳萍;曹来英;洛若愚;

    目的:探讨Th17/Treg细胞在不明原因复发性流产患者外周血、子宫蜕膜组织中的变化以及Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-6的表达情况。方法:应用流式细胞术检测20例不明原因复发性流产患者(实验组)、20例正常早期妊娠人工流产患者(对照组)外周血、子宫蜕膜组织中Th17细胞和Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比例。ELISA法检测两组患者血清中IL-17和IL-6的浓度,Q-PCR检测两组患者子宫蜕膜组织中IL-17和IL-6mR-NA的表达。结果:20例实验组患者外周血、子宫蜕膜组织中Th17细胞占CD4+T淋巴细胞的比例为(1.9±0.3)%,(1.5±0.4)%,高于20例对照组患者的(1.0±0.2)%、(0.5±0.1)%,实验组患者中Treg细胞占CD4+T细胞的比例分别为(5.2±1.1)%、(7.5±1.4)%,低于对照组患者的(8.8±1.3)%、(12.1±1.3)%(P<0.01)。20例实验组患者血清及子宫蜕膜组织中IL-17和IL-6的表达水平高于对照组。结论:不明原因复发性流产患者中Treg细胞降低,Th17细胞增加并高分泌IL-17和IL-6,这可能是流产的重要原因。

    2011年06期 v.32 773-777页 [查看摘要][在线阅读][下载 277K]
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  • 湖北省2006-2007年监测点居民伤害死因分析

    孔德广;张庆军;申幸福;崔晓晨;郭毅;

    目的:了解湖北省监测点居民伤害死因及潜在寿命损失状况,为预防控制提供科学依据。方法:采用死亡率与潜在减寿年数(PYLL)等指标对湖北省2006-2007年监测点居民伤害死亡资料进行分析。结果:监测点居民伤害死亡5994例,粗死亡率为61.45/10万(标化死亡率为58.26/10万),其中男性3 725例、女性2 269例,粗死亡率分别为74.53/10万、47.71/10万(标化死亡率分别为68.78/10万、46.14/10万),男性高于女性。伤害死因前5位依次是自杀、交通事故、意外跌落、溺水和砸伤压伤;以PYLL计,前5位依次为交通事故、自杀、溺水、意外跌落和砸伤压伤。各年龄段伤害死因各有特点。结论:交通事故、自杀、溺水、意外跌落和砸伤压伤是湖北省监测点居民主要伤害死因,交通事故、自杀是导致监测点居民"早死"和寿命损失的主要伤害死因。

    2011年06期 v.32 778-782页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K]
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  • 自体骨髓细胞心肌内注射治疗缺血性心脏病

    陈治国;陈宝钧;赵轲;

    目的:研究冠脉搭桥术(CABG)中直视下心肌内注射移植骨髓单个核细胞治疗缺血性心脏病的可行性和疗效。方法:入选经冠状动脉造影确诊的冠心病患者24例,随机分为骨髓干细胞移植组(12例)和对照组(12例)。移植组除常规手术治疗外,同期术中将骨髓单个核细胞悬液分多点注射到缺血心肌内。对照组仅采用常规手术治疗。用经胸超声心动图和单光子放射计算机断层显像术(SPECT)比较两组治疗前、后超声指标和心肌灌注缺损区面积。结果:术后随访1年,经胸超声心动图显示,与术前及对照组术后相比,移植组左室射血分数等指标明显改善(P<0.05);SPECT显示,移植组心肌灌注缺损面积明显降低(P<0.05)。移植组在移植术中和术后均无并发症发生。结论:冠脉搭桥术中心肌内注射移植骨髓干细胞治疗缺血性心脏病安全可行,术后能改善左室收缩功能及心肌血流灌注。

    2011年06期 v.32 783-785页 [查看摘要][在线阅读][下载 98K]
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  • 七氟醚吸入麻醉在小儿视网膜疾病检查和治疗中的应用

    肖璇;范雯;邢怡桥;陈长征;王龙;郁想想;叶美红;

    目的:探讨七氟醚吸入麻醉在小儿视网膜疾病检查和治疗中的可行性和安全性。方法:回顾分析2010年9月至2011年6月在我眼科中心采用七氟醚吸入麻醉,接受视网膜疾病检查和治疗的小儿89例,监测麻醉过程中患儿各项生命体征和血流动力学指标,观察诱导时患儿反应、术中情况和不良反应等,记录诱导时间、苏醒时间等。结果:所有患儿均能平稳进入麻醉状态,麻醉效果满意,术中生命体征稳定,血流动力学指标均在正常范围;诱导时间为(65±12)s,苏醒时间为(9.3±6.2)min;全组病例术中未见体动,麻醉诱导至术毕完全清醒均无不良反应。结论:七氟醚吸入麻醉具有诱导和苏醒迅速,术中维持平稳等优点,可广泛用于小儿视网膜疾病的检查和治疗。

    2011年06期 v.32 786-788页 [查看摘要][在线阅读][下载 94K]
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  • 蛋白激酶C-δ抑制剂Rottlerin抑制造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡

    李晓宁;肖劲松;喻明霞;胡雪峰;水华;吴小燕;

    目的:研究蛋白激酶C-δ(PKC-δ)抑制剂Rottlerin在造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用及其机制。方法:体外培养的大鼠肾小管细胞(NRK-52E)分别与不同碘浓度(25,50,100,150gI/L)的碘帕醇(非离子型造影剂)共孵育2h;或者以100gI/L碘帕醇先后处理NRK-52E细胞0.5,1,2,4h,相同渗透浓度(420mOsm/kg)的甘露醇处理4h作为对照;部分细胞用2μmol/L Rottlerin与100gI/L碘帕醇共同处理2h。Hoechst 33342染色检测凋亡细胞核形态并计算凋亡细胞百分比;并以DEVD-AFC为底物,用荧光酶标仪测量Caspase-3酶活性;用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧产物(ROS)水平;用Western blot检测PKC-δ蛋白表达和磷酸化。结果:碘帕醇与NRK-52E细胞共孵育后,细胞内PKC-δ蛋白表达和Tyr-311位点磷酸化增加,细胞内ROS产生增加,Caspase酶活性上升。碘帕醇呈浓度和时间依赖性诱导NRK-52E细胞凋亡。Rottlerin可明显抑制以上变化。结论:PKC-δ抑制剂Rottlerin通过抑制PKC-δ活化和细胞内氧化应激抑制碘帕醇诱导的NRK-52E细胞凋亡,为造影剂肾病的预防和治疗提供了新靶点和新药物。

    2011年06期 v.32 789-792页 [查看摘要][在线阅读][下载 184K]
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  • 肝型脂肪酸结合蛋白在重症患者急性肾损伤早期诊断中的意义

    黄云芳;陈文莉;方珣;

    目的:探讨尿肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)在重症患者急性肾损伤(AKI)中的早期诊断价值。方法:以我院收治的危重症患者为观察对象,按照阿姆斯特丹AKI诊断标准,将5d内符合诊断标准的AKI患者纳入AKI组(12例),对照组(12例)由匹配的非AKI患者构成。每24h收集尿标本,持续5d。ELISA法检测尿L-FABP水平。以受试者工作特征曲线评价L-FABP对AKI的诊断作用。结果:与AKI诊断前3d比较,AKI诊断前2d及1d患者尿L-FABP均明显增高(P均<0.05),但尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及血肌酐(Scr)无明显改变(P均>0.05);观察期间对照组尿L-FABP、NAG、Scr均无明显变化(P均>0.05)。AKI诊断前3d尿L-FABP、NAG、Scr对AKI均无诊断作用;AKI诊断前2d及1d尿L-FABP对AKI具有早期诊断作用,而NAG、Scr无早期诊断作用。结论:尿L-FABP对重症患者AKI具有较高的敏感性和特异性,可能具有AKI早期诊断价值。

    2011年06期 v.32 793-795页 [查看摘要][在线阅读][下载 127K]
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  • HCG注射日每卵泡血清雌激素水平及孕酮/雌激素比值与IVF助孕结局的关系

    路锦;张少娣;张翠莲;耿嘉瑄;梁琳琳;

    目的:探讨人绒毛膜促性腺激素注射日(HCG日)每卵泡血清雌激素水平及孕酮/雌激素(P/E2)比值对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕结局的预测价值。方法:接受常规IVF-ET助孕的不孕症患者236例,按照HCG日每卵泡血清E2水平分为5组:A组10例(E2<513pmol/L),B组81例(513pmol/L≤E2≤1 026pmol/L),C组86例(1 027pmol/L≤E2≤1 540pmol/L),D组47例(1 541pmol/L≤E2≤2 055pmol/L),E组12例(E2>2 055pmol/L);按照HCG日P/E2比值分为3组:A’组114例(P/E2<0.35),B’组96例(0.35≤P/E2≤0.70),C’组26例(P/E2>0.70)。回顾性分析IVF助孕结局。结果:HCG日每卵泡血清E2水平<513pmol/L及E2>2 055pmol/L时受精率(70.87%,70.07%)最低。HCG日每卵泡血清E2水平<513pmol/L时妊娠率(30.00%)最低。HCG日血清P/E2比值>0.7时妊娠率最低。结论:在控制性促排卵过程中,HCG日每卵泡血清E2水平结合P/E2比值是促排卵过程中扳机时机的重要参考指标,合适的雌孕激素水平是影响IVF助孕结局的重要因素。

    2011年06期 v.32 796-799页 [查看摘要][在线阅读][下载 123K]
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  • 丹参酮ⅡA联合阿托伐他汀钙对合并大血管病变2型糖尿病患者血浆脂质过氧化产物和IL-6水平的影响

    李雪松;

    目的:观察丹参酮ⅡA与阿托伐他汀钙联合治疗对合并大血管病变2型糖尿病患者血浆脂质过氧化产物和IL-6水平的影响。方法:将合并大血管病变的66例2型糖尿病患者随机分为两组,其中,实验组34例,给予丹参酮ⅡA与阿托伐他汀钙联合治疗;对照组32例,给予阿托伐他汀钙治疗,总疗程2周。比较治疗前后两组患者氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和白介素-6(IL-6)水平的变化。结果:治疗前,两组患者ox-LDL、MDA和IL-6水平均无显著性差异(P>0.05);治疗后,两组患者ox-LDL、MDA和IL-6水平较治疗前显著降低(均为P<0.05);治疗后,实验组ox-LDL、MDA和IL-6水平的减少较对照组更具显著性(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA与阿托伐他汀钙联合治疗能有效抑制2型糖尿病患者IL-6的表达,减轻脂质过氧化损伤。

    2011年06期 v.32 800-802+812页 [查看摘要][在线阅读][下载 123K]
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  • 噻托溴铵和无创机械通气联合应用在重度稳定期慢性阻塞性肺疾病患者治疗中的价值

    吴小军;聂汉祥;余红樱;李清泉;

    目的:探讨噻托溴铵和无创机械通气联合应用在重度稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者治疗中的价值。方法:采取平行、对照、随机研究。将40例病人随机分为噻托溴铵组(T)和噻托溴铵加无创机械通气组(T+B),研究周期为8周。在治疗前1d,第4周末,第8周末分别血气分析、肺功能,并通过Borg评分、6min步行试验(6MWT)、圣乔治呼吸问卷(SGRQ)对患者总体健康状况进行评价。结果:治疗前后比较,T组IC明显增高(P<0.05),FEV1、FEV1占预计值百分比、FEV1/FVC无明显增高;而T+B组FEV1、FEV1占预计值百分比、FEV1/FVC和IC均增高(P<0.05);两组间比较,T+B组FEV1、FEV1占预计值百分比、FEV1/FVC均高于T组(P<0.05);T组、T+B组PaO2均明显增高(P<0.05),而PaCO2均无明显变化;两组间PaO2和PaCO2无显著性差异;T组、T+B组6MWD均明显提高,而Borg评分均明显下降(P<0.05),两组间6MWD和Borg评分无显著性差异。两组SGRQ下降均超过4分,T+B组SGRQ明显低于T组(P<0.05)。结论:两组病人中,氧分压得到了明显地改善,运动的耐受力、呼吸困难指数和生活质量都得到了明显的提高,表明噻托溴铵在重度稳定期COPD患者康复治疗中具有重要的价值;与单一噻托溴铵治疗组比较,联合治疗组FEV1得到了明显的改善,SGRQ评分明显下降,表明后者优于前者。

    2011年06期 v.32 803-807页 [查看摘要][在线阅读][下载 137K]
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  • 无症状过敏者外周血单个核细胞存在过敏原刺激后的高水平IL-10反应

    王丽慧;杨炯;林宇辉;

    目的:测定无症状的过敏者外周血单个核细胞(PBMC)经特异性过敏原刺激后CD4+IL-10+调节性T细胞数量和IL-10水平,并比较其与过敏性哮喘患者和不过敏健康人的差异。方法:选取无症状的尘螨过敏者24例,急性发作期的尘螨过敏性哮喘患者20例,不过敏的健康人22例,均分离PBMC并CFSE染色,分别在不刺激和1mg/L尘螨抗原(rDer p 1)刺激情况下体外培养7d。流式细胞仪检测各组CD4+IL-10+T细胞/CD4+细胞百分比,分析CD4+IL-10+T细胞分裂指数;ELISA法检测各组细胞培养上清液中IL-10和TGF-β1的水平。结果:①rDer p 1刺激后无症状的尘螨过敏者CD4+IL-10+T细胞/CD4+细胞百分比高于过敏性哮喘患者;无论刺激与否,无症状的尘螨过敏者CD4+IL-10+T细胞/CD4+细胞百分比与不过敏的健康人水平接近。②与不过敏的健康人和过敏性哮喘患者比较,无症状的尘螨过敏者表现为rDer p 1刺激后PBMC高水平的IL-10反应。结论:无症状过敏的发生可能与机体对特异性过敏原刺激产生高水平的IL-10反应有关。

    2011年06期 v.32 808-812页 [查看摘要][在线阅读][下载 212K]
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  • 双水平正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

    王新荣;高永平;赵苏;

    目的:探讨双水平正压通气(BiPAP)呼吸机治疗中到重度慢性阻塞性肺病(COPD)合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的疗效。方法:经肺功能和睡眠呼吸监测诊断的中到重度COPD合并OSAS患者共30例,随机分成两组,分别给予氧疗和BiPAP呼吸机治疗3月。结果:中到重度COPD合并OSAS患者使用BiPAP呼吸机治疗后明显改善呼吸衰竭,睡眠监测指标呼吸紊乱总次数减少,呼吸暂停时间缩短,夜间最低血氧饱和度升高,氧饱和度小于90%的时间缩短,提高日间平均氧饱和度,同时能改善肺功能,降低气道阻力。结论:使用BiPAP呼吸机治疗中到重度COPD合并OSAS能取得较好疗效,不仅能改善夜间睡眠,同时能改善肺功能。

    2011年06期 v.32 813-815+819页 [查看摘要][在线阅读][下载 113K]
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  • 玻璃体切除联合硅油填充术治疗外伤性睫状体分离

    刘晓姣;杨安怀;

    目的:探讨玻璃体切除联合硅油填充在睫状体分离中的临床治疗效果。方法:回顾性分析2003年3月-2008年3月于我院确诊的22例外伤性睫状体分离患者的临床资料,所有患者均行玻璃体切除联合硅油填充术。术后4-5个月行硅油取出术。结果:19例患者术后眼压恢复正常,17例患者术后视力明显提高,5例患者术后第7天超声生物显微镜(UBM)示"睫状体分离,分离程度较术前减轻"(眼压正常)。术后第1个月复查UBM,示"睫状体复位"。其余患者UBM检查均提示"睫状体复位"。术后4-5个月所有患者行硅油取出术,取出后行视力、眼压及UBM检查,16例患者术后视力无明显变化,20例患者术后眼压正常,2例患者术后眼压低,予以激素治疗后恢复正常。术后第7天、3个月复查UBM示"睫状体在位"。结论:玻璃体切除联合硅油填充术在治疗外伤性睫状体分离,特别是伴有其他严重眼外伤者,具有优势。

    2011年06期 v.32 816-819页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
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  • 早期大重量颅骨牵引快速复位在下颈椎骨折脱位中的应用

    赵志刚;贾新华;刘明;李鹏;高鑫峰;勘武生;

    目的:探讨早期渐进性大重量颅骨牵引快速复位在下颈椎骨折脱位并关节突交锁治疗中的作用。方法:自2003年1月-2007年7月共收治下颈椎骨折脱位并关节突交锁患者26例,所有患者均在清醒状态及持续心电监护、C臂透视下,于颈部屈曲位行早期渐进性大重量颅骨牵引快速复位,牵引起始重量10kg,每5min左右增重1-2kg,直至复位。复位成功后择期手术治疗。复位前、后按ASIA神经功能分级方法行脊髓功能评定。结果:所有患者均复位,平均复位牵引重量28kg(14-49kg),平均牵引时间58min(20-140min),牵引过程中无1例脊髓神经损伤加重、生命体征异常。复位后脊髓神经功能有不同程度恢复。结论:早期渐进性大重量颅骨牵引快速复位下颈椎骨折脱位并关节突交锁,是一种安全、简单及有效的方法,可为脊髓损伤的恢复及下一步的手术治疗创造良好的条件。

    2011年06期 v.32 820-823页 [查看摘要][在线阅读][下载 160K]
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  • 经腓肠肌内侧入路治疗复杂的后交叉韧带撕脱骨折

    杨万波;蒋从斌;江洪辉;彭聚胜;鄢辉;范华波;

    目的:探讨经腓肠肌内侧入路治疗复杂的后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折的手术方法及疗效。方法:采用经腓肠肌内侧入路切开复位、空心螺钉置入治疗复杂的后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折9例。均为新鲜闭合性骨折。结果:本组手术过程顺利,住院期间无下肢深静脉血栓形成、血管神经损伤及感染等并发症发生。9例患者均获得随访,随访时间6-18个月,平均8个月,获得随访的患者骨折术后膝关节活动度全部正常,伤口均为Ⅰ期愈合,Lysholm评分由手术前平均57.6分提升至最后一次随访平均95分。结论:经腓肠肌内侧入路治疗后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折是简便、安全的手术入路,尤其对复杂的后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折,可充分显露骨折区域,对骨折进行有效复位、固定。术后恰当的康复锻炼可取得满意的临床疗效。

    2011年06期 v.32 824-827页 [查看摘要][在线阅读][下载 145K]
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  • 低温等离子射频扁桃体包膜内部分切除术与剥离切除术治疗慢性扁桃体炎疗效分析

    李俊;吴翔磊;周绪红;

    目的:探讨低温等离子射频扁桃体部分切除术在治疗慢性扁桃体炎手术中优势。方法:64例慢性增生性扁桃体炎患者随机分组,采取传统剥离法切除扁桃体和低温等离子射频行包膜内扁桃体部分切除,观察2组手术时间、术中出血量、术后疼痛评分及随访术后12-18月反复发炎情况。结果:低温等离子射频扁桃体部分切除术组的手术时间、术中出血量、术后疼痛评分均低于传统扁桃体剥离全切除术组(P<0.05),2组均未见术后反复发炎情况。结论:低温等离子射频扁桃体部分切除术治疗慢性扁桃体炎优于传统剥离方法。

    2011年06期 v.32 828-829+851页 [查看摘要][在线阅读][下载 88K]
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  • 固位纤维树脂夹板在青少年前牙外伤的临床应用

    蔡琴;吴新;夏金星;林娟;罗宁;

    目的:探讨固位纤维树脂夹板在青少年前牙外伤的临床应用效果。方法:选择13-18岁青少年前牙外伤患者50例,共71颗患牙,使用固位纤维树脂夹板固定。结果:固位3-4周临床复查,成功50颗,显效16颗,总有效率为92.96%;患者满意度调查各项结果均在90%以上。随访疗效评定,3个月复查,成功45颗,显效16颗,总有效率为89.71%;1年复查,成功42颗,显效15颗,总有效率为87.69%。结论:采用固位纤维树脂夹板固定青少年外伤牙,取得了良好可靠的临床疗效,且无痛苦,简便易行,美观舒适,是一种具有较好应用前景的牙外伤治疗方法。

    2011年06期 v.32 830-832页 [查看摘要][在线阅读][下载 93K]
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  • 严重下肢缺血的腔内血管介入治疗体会

    吴云;

    目的:探讨严重缺血下肢的腔内血管治疗的可行性、优越性。方法:29例严重缺血下肢患者,Fontaine分期:Ⅲ期22例,Ⅳ期7例,术前行多普勒彩超、CT血管造影(CTA)或磁共振血管造影(MRA)检查,选择顺或逆行股总动脉穿刺,数字减影血管造影(DSA)机下行下肢动脉经皮腔内血管成形术(PTA)+支架成形术或置管溶栓后再PTA。结果:29例病人技术成功率100%,截趾率10.34%,保肢率96.55%,下肢皮温变暖,行走功能明显改善。结论:腔内血管介入治疗因为微创、可重复性强、病人身体条件易承受、保肢率高,应成为恢复严重下肢缺血血供的首选治疗手段。

    2011年06期 v.32 833-836页 [查看摘要][在线阅读][下载 112K]
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  • C臂机下经皮肾镜治疗上尿路结石63例

    马先俊;严春晖;谌珩;吴洋;

    目的:探讨C臂引导下经皮肾镜取石术(PCNL)处理上尿路结石的安全性和疗效。方法:对63例接受C臂引导行PCNL的患者进行回顾分析及总结。结果:经皮肾通道成功建立62例(98.41%),均建立F16-18经皮肾通道并成功碎石,其中单通道56例,双通道5例,三通道1例;47例行Ⅰ期取石,15例行Ⅱ、Ⅲ期取石;结石取净率为88.71%;术中、术后中度明显出血2例,迟发性出血2例。结论:C臂引导下PCNL治疗上尿路结石直观、安全、有效、创伤小,特别适合开展PCNL的早期应用。

    2011年06期 v.32 837-839页 [查看摘要][在线阅读][下载 98K]
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  • 微创腔内技术在输尿管新膀胱吻合口狭窄治疗中的应用

    陈忠军;张先觉;佃俊;陈士祥;杨光华;周家杰;丁树平;

    目的:探讨微创腔内技术在输尿管新膀胱吻合口狭窄中的临床应用价值。方法:对13例行膀胱全切术后出现不同程度输尿管新膀胱吻合口狭窄的患者,利用微创腔内技术行输尿管狭窄切开术,术后用影像学检查进行随访,了解输尿管新膀胱吻合口再次发生狭窄机会及分肾功能的变化。结果:13例患者治疗均获成功。患者拔除输尿管支架管后3个月行影像学复查,与微创手术前相比,没有出现输尿管新膀胱吻合口再狭窄,术后6月、12月分别有1例、3例患者发生输尿管新膀胱吻合口再狭窄和分肾功能无明显的改善。结论:利用微创腔内技术处理输尿管新膀胱吻合口狭窄,操作简单,创伤小,可重复,值得临床推广应用。

    2011年06期 v.32 840-842页 [查看摘要][在线阅读][下载 88K]
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  • 老年社区获得性肺炎临床分析

    程真顺;杨炯;叶燕青;

    目的:观察老年患者社区获得性肺炎(CAP)的临床及治疗现况。方法:连续入选2007年9月至2010年5月在我院呼吸科住院治疗的CAP患者432例,记录临床特点、基础疾病、并发症、病原学和治疗情况,分析年龄≥65岁与非老年患者的差异。结果:432例CAP患者中,老年人共136例(31.4%),与非老年患者比较,老年CAP患者并存基础疾病多(P<0.01)、易发生神志障碍(20%比6%,P<0.01)、呼吸衰竭(18%比7%,P<0.01)和休克(15%比7%,P<0.01);与非老年患者比较,老年CAP患者革兰阴性杆菌发生率更高(63.6%比41.6%,P<0.01),抗生素选用碳青酶烯类更多,联合用药抗感染多;老年CAP患者住院时间比非老年患者长,治疗费用也更多。结论:老年CAP患者具有并存疾病多,易发展为重症且治疗更复杂、更困难的特点。

    2011年06期 v.32 843-845+856页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K]
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  • 恩度联合EP方案一线治疗小细胞肺癌的疗效及安全性分析

    苏林;

    目的:观察恩度联合EP方案治疗晚期小细胞肺癌的疗效及安全性。方法:47例符合入组条件的晚期小细胞肺癌患者随机分为2组:对照组(25例)采用EP方案;实验组(22例)在对照组的基础上于每周期化疗第1-14天给予恩度15mg/d,21d为1个周期,每2周期评价疗效。观察两组患者的毒副反应、客观缓解率、无进展生存时间以及总生存时间的差异。结果:对照组客观缓解率40%,实验组缓解率为68%,中位无进展时间分别为6.4个月和5.5个月,中位生存期分别为10.9个月和10个月,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率无明显差别(P>0.05)。结论:EP化疗联合恩度可提高小细胞肺癌患者近期疗效及远期生存,且不良反应小,安全性好。

    2011年06期 v.32 846-848页 [查看摘要][在线阅读][下载 109K]
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  • 某地区非淋球菌尿道炎患者支原体检出及耐药性调查

    袁力;

    目的:了解某地区非淋球菌尿道炎患者解脲脲原体(Uu)和人形支原体(Mh)感染及耐药情况。方法:采用支原体培养技术对256例非淋球菌尿道炎患者分泌物标本进行Uu及Mh培养和药物敏感性检测,分析支原体感染及耐药性。结果:在256例标本中,支原体检出123例,总检出率48.0%。Uu,Mh及Uu+Mh混合感染阳性率分别为35.2%,2.7%和10.2%,其中111例男性患者Uu检出31例,阳性率27.9%,145例女性患者Uu检出59例,阳性率40.7%,女性患者感染率明显高于男性(P<0.05)。支原体对红霉素、罗红霉素、交沙霉素、强力霉素、美满霉素较为敏感,敏感率分别为64.2%,56.1%,60.2%,61.8%,64.2%;对四环素、乙酰螺旋霉素、氧氟沙星耐药,耐药率分别为41.5%,38.2%,49.6%。结论:泌尿生殖道支原体感染以Uu为主,且女性感染率高于男性。该地区支原体感染治疗推荐红霉素、罗红霉素、交沙霉素、强力霉素及美满霉素。

    2011年06期 v.32 849-851页 [查看摘要][在线阅读][下载 99K]
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综述

  • Ki67在乳腺癌的研究进展

    杨雪琴;李雁;

    乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,在分子水平上加深对乳腺癌生物学行为的认识有助于临床诊疗。Ki67是与细胞增殖相关的核抗原,其抗原表达随细胞周期的变化而变化,在肿瘤进展中起着重要作用。本文从Ki67在乳腺癌的诊断、监测、预后及存在的问题等方面的研究进展进行综述。

    2011年06期 v.32 852-856页 [查看摘要][在线阅读][下载 132K]
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附录